Определение количества амитраза в организме пчел после обработки их препаратом "Дилабик"
К эффективным средствам борьбы с варроатозом относится применение амитраз. Их соединения обладают умеренной токсичностью для теплокровных и имеет высокую акарицидность на клещей варроа. При этом они быстро разлагается в кислых средах, что позволяет широко использовать его в пчеловодстве. Для уменьшения иммунной защиты клещом варроа к амитразу были синтезированы два изомера, которые не позволяют приобретать устойчивость к лекарственной форме “ Дилабик” и обладают синергизмом.
Приготовленная лекарственная форма “ Дилабик” состоит из растворителя и эмульгатора 4-го класса токсичности с содержанием очищенных растительных веществ типа инулинов, которые имеют высокую степень дисперсности, и при обработке пчел от клеща варроа быстро проникают в гемолимфу пчелы, тем самым эффективнее проявляет свои лечебные действия.
Рабочая форма “Дилабик” в водных растворах не дает седиментации, что дает возможность равномерно находится в водных растворах и увеличивать эффективность данного препарата на 99 -100%.
Результаты исследований
Осенью пчелиные семьи обрабатывали препаратом “ Дилабик”, согласно утвержденной инструкции Россельхознадзора ПВР-2-1-9/00055, при отсутствии печатного расплода. Семьи пчел отбирали одинаковой силы с молодыми матками этого года. На улочку, полностью обсиживаемую пчелами, наносили дозатором 10 мл эмульгатора, поливая мелкой струей на гнезда пчелиных семей, занимающих 10 улочек. В результате расходовали 100 мл эмульгатора, что составляело 6,25 мг амитраза, вносимого на семью пчел.
По истечение 3-4-х часов после обработки от клеща варроа препаратом дилабик, отбирали с разных улочек в садки по 500-560 пчел. Первую группу пчел подкармливали полизином с 60% сахарозой в концентрации 0,5%, вторую группу подкармливали хитозаном с 60% сахарозой в количестве 3 мг/мл, в качестве контроля третью группу подкармливали чистой 60% сахарозой, а затем определяли динамику выведения амитраза из тела пчел (см. табл. 2 )
Для определения количества амитраза в теле пчел, отбирали с различных улочек по 100-150 пчел и их закуривали, затем переносили в фарфоровую ступку и добавляли 30 мл о-ксилола, мелко растирали пчел фарфоровым пестиком, затем в течение 20 минут отстаивали и сливали прозрачную экстрагированную часть, а затем снова заливали 40 мл о-ксилола и снова растирали, отстаивали в течение 20 минут и сливали, а затем добавляли 30 мл о-ксилола и проводили экстракцию аналогично предыдущей. Для фильтрации использовали бумажный фильтр пористостью 0,036 мк. Фильтрат в количестве 100 мл упаривали под вакуумом при температуре 38-40°С до 20-30 мл и проводили анализ на содержание амитраза в теле пчел методом высокоэффективной жидкостной хроматогарфии (ВЭЖХ) для разделения примесей на колонке спектрофотометрическим детектором при длине волны 310нм. В качестве стандартов при градуировке использовали стандартный образец амитраза с известным содержанием основного вещества (ГСО).
Находившихся в садке пчел аналировали на содержание в их кишечнике и груди амитраза. Для этого отбирали 50 пчел и закуривали их, затем ампутировали кишечник на часовое стекло, смывали его в фарфоровую ступку о-ксилолом и растирали фарфоровым пестиком, отстаивали верхний слой и сливали в 50 мл стакан, а затем снова заливали 20 мл о-ксилола, снова экстрагировали, затем фильтровали на бумажном фильтре пористостью 0,036 мк.
Фильтры промыли 10 мл о-ксилолом, затем фильтрат в количестве 40 мл упаривали под вакуумом при температуре 38-40°С до 5мл и подвергали анализу на содержание в кишечнике пчел амитраза методом (ВЭЖХ). Аналогичным способом определяли содержание амитраза в груди пчел.
Пчел содержали в подопытных садках в тех же семьях и в тех же ульях-лежаках, разделенных фанерной перегородкой с отверстиями, закрытыми металлической сеткой 3х3 мм.
В садках пчелы вели себя спокойно, так как ощущали присутствие пчелиной матки. Через определенный интервал проводили исследование по выведению амитраза из отделов тела пчел (груди и кишечника) с помощью полизина и хитозана в смеси с 60% сахарозой, контроль сахарный сироп (см. табл. 2)
1. Количество внесенного амитраза дилабик в улей пчел и количество обнаруженного амитраза дилабик в теле пчел.
таблица 1
№ серии |
Количество
внесенного
амитраза
в улей пчел,
мг М ± 0,02 - 0,03 |
Содержание
амитраза в теле
одной пчелы,
мг/ пчела М ± 0,05 |
Количество
пчелы в улье
М ± 400 - 500 |
Количество
забираемого
амитраза пчелами
мг/кол-во пчел
М ± 0,05 |
Количествово
оставшегося
амитраза мг
М ± 0,02 |
1.
2.
3. |
6,25 ± 0,03
5,625 ± 0,02
6,25 ± 0,03 |
0,000585 ± 0,05
0,000548 ± 0,05
0,000591 ± 0,05 |
10000 ± 400
9500 ± 400
10000 ± 500 |
5,85 ± 0,05
5,20 ± 0,05
5,91 ± 0,05 |
0,36 ± 0,2
0,425 ± 0,2
0,34 ± 0,2 |
Среднее |
6,041 ± 0,26 |
0,000576 ± 0,05 |
9833 ± 433 |
5,66 ± 0,05 |
0,375 ± 0,2 |
2. Динамики выведения амитраза дилабик из тела пчел.
таблица 2
Корм |
Время
после
обработки |
Отделы тела пчел |
Грудь |
Кишечник |
Полизин |
4 часа |
0,000199 ± 0,05 |
0,000377 ± 0,05 |
Полизин |
3 суток |
0,000099 ± 0,05 |
0,000094 ± 0,05 |
Полизин |
6 суток |
0,000024 ±0,05 |
не обнаружено |
Полизин |
12 суток |
не обнаружено |
не обнаружено |
Хитозан |
4 часа |
0,000218 ± 0,05 |
0,000386 ± 0,05 |
Хитозан |
3 суток |
0,000109 ± 0,05 |
0,000122 ± 0,05 |
Хитозан |
6 суток |
0,000054 ± 0,05 |
0,000012 ± 0,05 |
Хитозан |
12 суток |
не обнаружено |
не обнаружено |
Контроль |
|
|
|
Сахароза |
4 часа |
0,000209 ± 0,05 |
0,000369 ± 0,05 |
Сахароза |
3 суток |
0,000184 ± 0,05 |
0,000194 ± 0,05 |
Сахароза |
6 суток |
0,000162 ± 0,05 |
0,000123 ± 0,05 |
Сахароза |
12 суток |
0,000081 ± 0,05 |
0,000061 ± 0,05 |
Сахароза |
15 суток |
0,0000457 ± 0,05 |
0,0000312 ± 0,05 |
Сахароза |
20 суток |
0,0000023 ± 0,05 |
0,0000013 ± 0,05 |
Сахароза |
25 суток |
0,0000012 ± 0,05 |
не обнаружено |
Сахароза |
30 суток |
не обнаружено |
не обнаружено |
Как видим из таблицы 1, при внесении амитраза “Дилабик” в ульи пчел при обработке их от клеща варроа, количество внесенного амитраза и забираемого пчелами существенно приближается к 100% забираемости.
Таким образом. пчелы очищают и не оставляют в медопродуктах акарицидов амитраза. А из таблицы 2 видно, что инактивация амитраза в кишечнике пчел играет существенную роль в различных подкормках при разложении акарицида, однако при подкормке пчел полизином и хитозаном разложение в организме пчел происходит в течение 6-12 суток, а хитозаном в течение 12 суток, при подкормке сахарозой разложение амитраза в организме пчел происходит в течение 30 суток. Из всего выше сказанного следует, что подкормка пчел Полизином и Хитозаном улучшает физиологическое состояние пчел и приводит к быстрой инактивации амитраза в их организме, а употребление при подкормке пчел сахарозой, приводит к задержанию разложения амитраза в организме пчелы, что приводит к ослаблению пчелиных семей, идущих в зимовку.
В.В.БАНЬКОВСКИЙ, Е.К.ЕСЬКОВ,
Д.В.БАНЬКОВСКИЙ, Г.С.ЯРОШЕВИЧ
|